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凝膠成像分析系統(tǒng)的應用知識

日期:2025-06-19 04:25
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摘要:
   凝膠成像即對DNA或RNA膠進行切膠、拍照、觀察、分析的實驗室類儀器,凝膠成像分析系統(tǒng)可以應用于分子量計算、密度掃描、密度定量、PCR定量等生物工程常規(guī)研究。凝膠成像分析系統(tǒng)可以用于:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。
 ?。?)分子量定量
  對于般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。
 ?。?)密度定量
  般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
  (3)密度掃描
  在分子生物學和生物工程研究中,常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
  (4)PCR定量
  PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數(shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數(shù),密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。